真菌格莫瑞六亞甲基四胺(Gomori’s Methenamine Silver;GMS)銀染試劑盒-原理性說明書參考
真菌的細(xì)胞壁含有粘多糖(mucopolyssachride)成分,氧化后,釋放出醛基(aldehyde group),與銀離子反應(yīng),使銀離子還原為黑色金屬銀,產(chǎn)生金黃色的背景下,棕黑色的真菌細(xì)胞。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO固著液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO氧化液(Reagent C) 毫升
HEPENGBIO強(qiáng)化液(Reagent D) 毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent E) 毫升
HEPENGBIO置換液(Reagent F) 毫升
HEPENGBIO穩(wěn)定液(Reagent G) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO染色液(Reagent E)避免光照;HEPENGBIO氧化液(Reagent C)具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證3月
用戶自備
恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于樣品反應(yīng)孵育
蓋玻片:用于切片封片
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 準(zhǔn)備好真菌涂片或4微米厚的石蠟切片脫蠟處理
2. 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
4. 小心加上xx微升HEPENGBIO固著液(Reagent B)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
5. 室溫下孵育15分鐘
6. 小心移去切片上的HEPENGBIO固著液(Reagent B)
7. 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
9. 小心加上xx微升HEPENGBIO氧化液(Reagent C)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
10. 室溫下孵育60分鐘
11. 小心移去切片上的HEPENGBIO氧化液(Reagent C)
12. 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
13. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
14. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟12至13二次
15. 小心加上xx微升HEPENGBIO強(qiáng)化液(Reagent D)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
16. 室溫下孵育1分鐘
17. 小心移去切片上的HEPENGBIO強(qiáng)化液(Reagent D)
18. 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
19. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
20. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟18至19二次
21. 小心加入xx微升HEPENGBIO染色液(Reagent E)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
22. 放進(jìn)50℃恒溫培養(yǎng)箱孵育60分鐘,或直至出現(xiàn)棕色(注意:避免干枯)
23. 小心移去HEPENGBIO染色液(Reagent E)
24. 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
25. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
26. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟24至25二次
27. 小心加上xx微升HEPENGBIO置換液(Reagent F)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
28. 室溫下孵育1分鐘,或直至出現(xiàn)灰色
29. 小心移去切片上的HEPENGBIO置換液(Reagent F)
30. 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
31. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
32. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟30至31二次
33. 小心加入xx微升HEPENGBIO穩(wěn)定液(Reagent G)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
34. 室溫下孵育3分鐘
35. 小心移去HEPENGBIO穩(wěn)定液(Reagent G)
36. 小心加入xx微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
37. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
38. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟36至37一次
39. (選擇步驟)復(fù)染處理 (建議使用HEPENGBIO淡綠(LIGHT GREEN)復(fù)染試劑盒——)
40. 即刻放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
41. 在一般光學(xué)顯微鏡下觀察: