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赫澎(上海)生物科技有限公司
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石蠟切片小膠質(zhì)細(xì)胞(MICROGLIA)郝特卡(HORTEGA)染色試劑盒
產(chǎn)品編號 HPBIO-JM4647
中文名稱: 石蠟切片小膠質(zhì)細(xì)胞(MICROGLIA)郝特卡(HORTEGA)染色試劑盒
英文名稱:
品牌: 赫澎生物HEPENGBIO
規(guī)格型號: 50次
神經(jīng)膠質(zhì)(neuroglia),是廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的膠質(zhì)細(xì)胞(glial cell或gliocyte),主要分成三大類型:大膠質(zhì)細(xì)胞(macroglia)或星形細(xì)胞(astrocyte)、少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)和小膠質(zhì)細(xì)胞(microglia)。星形細(xì)胞又分為纖維性星形膠質(zhì)細(xì)胞(fibrous astrocyte)和原漿性星形膠質(zhì)細(xì)胞(protoplasmic astrocyte)。神經(jīng)膠質(zhì)具有支持、滋養(yǎng)神經(jīng)元的作用,預(yù)防神經(jīng)沖動擴散的絕緣(insulator)作用,也有吸收和調(diào)節(jié)某些活性物質(zhì)的功能。膠質(zhì)細(xì)胞雖有突起,但不具軸突,也不產(chǎn)生動作電位。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞有分裂的能力,還能夠吞噬因損傷而解體破碎的神經(jīng)元,并能修復(fù)。原漿型星形細(xì)胞多見于灰質(zhì),突起不規(guī)則,分支多而短曲;纖維型星形細(xì)胞分布于白質(zhì)內(nèi),呈放射狀,細(xì)長而直,分支少,表面光滑;少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于灰質(zhì)及白質(zhì)內(nèi),突起比其他膠質(zhì)細(xì)胞少而短,呈圓形或橢圓形,染色稍深;小膠質(zhì)細(xì)胞分布于灰質(zhì)及白質(zhì)內(nèi),體小致密,呈長形。使用特殊銀染方法才能顯示神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài),例如郝特卡(Del Rio-Hortega)發(fā)明了神經(jīng)膠質(zhì)碳酸氨(silver carbonate)黑色反應(yīng)的浸銀(impregnation)染色,獲得小膠質(zhì)細(xì)胞的染色效果。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
固著液(Reagent A) 毫升
清理液(Reagent B) 毫升
脫蠟液(Reagent C)        毫升(自備)
補水液A(Reagent D) 毫升
補水液B(Reagent E) 毫升
補水液C(Reagent F) 毫升
染色液(Reagent G)   毫升
還原液(Reagent H) 毫升
穩(wěn)定液(Reagent I) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
 
保存方式
 
保存染色液(Reagent G) 在室溫下,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證3月
 
用戶自備
 
無菌手術(shù)刀和鑷子:用于解剖動物腦組織
小型玻璃染色缸:用于組織或切片處理的容器
切片機:用于組織切片
明膠化載玻片和蓋玻片:用于切片后鋪片
中性樹脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
 
實驗步驟
 
一、 樣本固著處理
 
1. 常規(guī)麻醉動物和手術(shù)(建議:使用生理鹽水由心臟處灌注三次,每次60毫升,去除血液直至澄清)
2. 使用適量的固著液(Reagent A灌注處理
3. 即刻小心取出腦組織
4. 小心放進到xx毫升固著液(Reagent A
5. 室溫下浸泡孵育2天
6. 即刻用無菌鑷子夾起組織塊 
7. 小心轉(zhuǎn)移到xx毫升清理液(Reagent B里 
8. 室溫下浸泡孵育2分鐘
9. 用綿紙吸干組織快
10. 即刻進行常規(guī)30%蔗糖脫水和石蠟處理后包埋
11. 取出組織塊,進行緩慢石蠟切片,為20至100微米厚,并鋪片在明膠化載玻片上
 
二、 蠟處理
 
1. 取出10片待測的20至100微米厚的石蠟包埋的組織切片 
2. 放進80℃烘箱,孵育30分鐘
3. 室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
 
染色缸  孵育時間 
xx毫升蠟液Reagent C  15分鐘
xx毫升蠟液Reagent C 15分鐘
xx毫升蠟液Reagent C 15分鐘
xx毫升補水液AReagent D 3分鐘
xx毫升補水液BReagent E 3分鐘
xx毫升補水液CReagent F 3分鐘
xx毫升清理液(Reagent B  3分鐘
 
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent B
 
三、 樣本染色處理
 
1. 小心加上xx微升 染色液(Reagent G),鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育5分鐘,或直至呈現(xiàn)黑色,即刻終止,避免光照
3. 小心移去染色液
4. 小心加上xx微升 還原(Reagent H),鋪滿整個切片樣品表面
5. 室溫下孵育5分鐘 
6. 小心移去還原液
7. 加上xx微升清理液(Reagent B)
8. 即刻移去清理液
9. 小心加上xx微升 穩(wěn)定(Reagent I),鋪滿整個切片樣品表面
10. 室溫下孵育5分鐘 
11. 小心移去穩(wěn)定液
12. 透明處理
13. 放上蓋玻片或封片(中性樹脂)
14. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察: 小膠質(zhì)細(xì)胞呈現(xiàn)黑色 
 
檢測報告(COA)
使用說明
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