氨基糖類(lèi)（amino sugar）是一類(lèi)含有氨基替代羥基的糖，目前發(fā)現(xiàn)有60多種，例如氨基葡萄糖（glucosamine）、氨基半乳糖（galactosamine），以及衍生物乙酰基氨基葡萄糖（acetylglucosamine）、唾液酸（sialic acid），和抗菌化合物氨基糖苷（aminoglycoside）等。氨基糖類(lèi)是地球上最古老和最豐富的有機(jī)化合物之一。其中氨基葡萄糖是糖基化蛋白生物合成的前體，甲殼綱動(dòng)物（crustacean）體外骨骼和真菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分。自然存在于動(dòng)物骨組織、骨髓、真菌細(xì)胞壁和貝類(lèi)動(dòng)物殼上。作為食物補(bǔ)充劑，有助于關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)和功能，尤其是骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis）患者。氨基半乳糖是糖蛋白類(lèi)激素，例如卵泡刺激素（follicle stimulating hormone；FSH）、促黃體激素（luteinizing hormone；LH）的成分，具有肝毒性。在堿性條件下，通過(guò)加熱處理，形成顯色素（chromogen），進(jìn)而與歐立希試劑（Ehrlich’s reagent），即酸性對(duì)二甲基氨基苯甲醛（N,N-dimethyl p-aminobenzaldehyde）反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色復(fù)合物，在分光光度儀（530nm 波長(zhǎng)）下出現(xiàn)吸光峰值的變化，來(lái)定量測(cè)定樣品中氨基糖類(lèi)量的總含量。 
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO堿性液（Reagent A）     毫升
HEPENGBIO反應(yīng)液（Reagent B）     毫升
HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）     微升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)     1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證3月
 
用戶(hù)自備
 
1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品配制和反應(yīng)的容器
15毫升錐形離心管：用于樣品反應(yīng)操作的容器
沸水裝置：用于反應(yīng)孵育
比色皿：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
實(shí)驗(yàn)步驟
 
一、標(biāo)準(zhǔn)樣品配制
 
1． 準(zhǔn)備好4個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管
2． 分別加入xx微升HEPENGBIO堿性液（Reagent A）到每個(gè)離心管
3． 移取xx微升HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到1號(hào)管，混勻
4． 小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到2號(hào)管，混勻
5． 小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的HEPENGBIO標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）到3號(hào)管，混勻
6． 將1至4號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表
 

管號(hào)	HEPENGBIO 標(biāo)準(zhǔn)液（Reagent C）	HEPENGBIO堿性液（Reagent A）	測(cè)定體系中 標(biāo)準(zhǔn)氨基葡萄糖含量
1	xx微升	xx微升	xx微克
2	xx微升1號(hào)管	xx微升	xx微克
3	xx微升2號(hào)管	xx微升	xx微克
4	——	xx微升	0

 
二、 樣品測(cè)定
 
1． 設(shè)定好分光光度儀：波長(zhǎng)530nm，并置零
2． 分別移取xx毫升HEPENGBIO堿性液（Reagent A）到15毫升離心管
3． 分別加入20微升上述制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品或待測(cè)樣品，混勻
4． 沸水煮沸1小時(shí)
5． 分別加入xx毫升HEPENGBIO反應(yīng)液（Reagent B），混勻
6． 室溫下冷卻10分鐘，避免光照
7． 轉(zhuǎn)移到新的比色皿
8． 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)（530nm波長(zhǎng)）：獲得吸光讀數(shù)
9． 構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光讀數(shù)；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)氨基葡萄糖含量（微克）
10． 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)氨基葡萄糖含量（微克）
11． 計(jì)算樣品實(shí)際氨基糖類(lèi)濃度（微克/毫升）