體外生育（in vitro production；IVP）包括三大步驟：卵母細(xì)胞體外成熟（in vitro maturation）、體外受精（in vitro fertilization；IVF）和體外培養(yǎng)（in vitro culture；IVC）。運(yùn)用體外系統(tǒng)產(chǎn)生胚胎，可以解決不育的問題。 通過使用化學(xué)性精制NCSU-23培養(yǎng)液，在胰島素、巰基乙醇和無脂肪酸血清白蛋白等的存在下，促進(jìn)受精卵細(xì)胞的卵裂和胚囊形成。
 
產(chǎn)品內(nèi)容
 
HEPENGBIO培養(yǎng)液（Reagent A）   毫升
產(chǎn)品說明書            1份
 
保存方式
 
保存在－20℃的冰箱里，有效保證6月
 
用戶自備
 
48孔細(xì)胞培養(yǎng)板：用于樣品操作的容器
細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于體外受精細(xì)胞培養(yǎng)
 
實(shí)驗(yàn)步驟
 
實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的HEPENGBIO培養(yǎng)液（Reagent A）從－20℃的冰箱里取出，置于38.5℃培養(yǎng)箱里均衡溫度。然后進(jìn)行下列操作。
 
1． 準(zhǔn)備好48孔細(xì)胞培養(yǎng)板
2． 轉(zhuǎn)移新的激活的受精卵細(xì)胞到48孔板的一個(gè)孔里
3． 移去其中的液體
4． 加入xx微升HEPENGBIO培養(yǎng)液（Reagent A）
5． 移去HEPENGBIO培養(yǎng)液（Reagent A）
6． 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至5二次
7． 加入xx微升HEPENGBIO培養(yǎng)液（Reagent A）
8． 放進(jìn)5％CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育48至144小時(shí)，溫度38.5℃，濕度飽和
9． 繼續(xù)后續(xù)胚胎發(fā)育
10． 或（熒光）顯微鏡觀察：使用赫斯特33342（Hoechst 33342）染色，觀察卵裂率（cleavage rate）、胚囊（blastocyst）形成等